Sperm Morfoloji Boyama Kiti; Kruger Metodu, 50 ml, 100 Test (445038050050)

Ambalaj Bilgisi: 50 ml, HDPE Damlalıklı Beyaz Şişe

Set Komponentleri:
A) Fiksatif: Formaldehit %37, Fosfat tamponu
B) Stain-I: Etanol %96, Rose Bengal, Neutral red, Fosfat tamponu
C) Stain-II: Etanol %96, Turuncu G, Pironin Y, Fosfat tamponu
D) Stain-III: Janus Green, Fast Green FCF, Fosfat tamponu

Özellikler:
Raf Ömrü: 2 Yıl
Sıcaklık: 15/25 °C

Uygulama şekli:
HAZIRLIK:
• 2 kaba (örneğin Coplin kavanozu) distile su doldurun. Suyu her kullanımda yenisi ile değişim sağlayın.
• Tüm komponentleri daldırma yöntemi için bir kaba (örneğin Coplin kavanozu) aktarın, sıvı seviyesinin boyanacak alanı kapsayacak kadar olmasına dikkat edin.
• Cam slaytları (lam) kullanmadan önce gerekirse alkol ile temizleyip, kurumaya bırakın.
BOYAMA:
1. Tercihen sıvılaştırılmış (likefaksiye) semen örneğinden, bir lam üzerine 5-10 µm koyun. Lam özerine ince bir film tabakası halinde yayın.
2. Yayma örneğini 37°C de yaklaşık 10-15 dk veya oda sıcaklığında 20-30 dk kurumasını bekleyin.
3. ‘A-Fiksatif’ kabını hazırlayın.
4. Yayma örneğini ‘A-Fiksatif’ kabının içine yavaşça daldırın. 10-15 dk sabitlenmesi için bekleyin.
5. Süre sonunda ‘A-Fiksatif’ kabının içinden preparatı yavaşça çıkarın. Fazla akan miktarı, emici kâğıdın üzerine dik koyarak akmasını bekleyin. Örneği silmeyin!
6. Preparatı, 37°C de yaklaşık 10-15 dakika veya oda sıcaklığında yaklaşık 20-30 dk kurumasını bekleyin.
7. Ardından preparatı distile su kabına 5 defa daldırıp çıkarın, fazla akan miktarı, emici kâğıdın üzerine dik koyarak akmasını bekleyin
8. Preparatı, ‘B- Stain I’ bulunan kaba 1 defa yavaşça daldırıp çıkarın. Preparatı 1 dk. ‘B- Stain I’ içinde bekletin. Ardından preparatı distile su kabına 2 defa daldırıp çıkarın. Fazla suyun/ boyanın akmasını bekleyin.
9. ‘C-Stain II’ olduğu kap içerisine preparatı 7 defa yavaşça daldırıp çıkarın. 7. daldırmada preparatı 5 dk ‘C-Stain II’ içinde bekletin. Ardından preparatı distile su kabına 2 defa daldırıp çıkarın. Fazla suyun/ boyanın akmasını bekleyin.
10. ‘D-Stain III’ olan kap içerisine preparatı 7 defa yavaşça daldırıp çıkarın. 7. Daldırmada preparatı 5 dk ‘D-Stain III’ içinde bekletin. Ardından preparatı distile su kabına 2 defa yavaşça daldırıp çıkarın. Fazla suyun/ boyanın akmasını bekleyin.
11. Preparatı havada ve dik bir şekilde kurumaya bırakın.
12. Mikroskop altında, immersiyon yağı damlatarak 100x altında inceleyin.

Teorik Sonuçlar:
Akrozom: Açık yeşil
Nükleus: Kırmızı / Pembe
Ekvatoral bölge : Soluk Yeşil
Orta parça : Koyu Yeşil
Kuyruk: Açık Yeşil